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英文名稱：Calprotectin ELISA KIT（stool）
【預期用途】
糞便鈣衛蛋白酶聯免疫吸附分析試劑盒用于定量測定人糞便中鈣衛蛋白（MRP 8/14）的含量。僅適用于體外診斷。僅供科研使用。
【概要說明】
鈣衛蛋白又叫MRP8/14，L1，(p8,14)，p34。
構成鈣衛蛋白異聚體的兩種蛋白名稱：
S
S
鈣衛蛋白是一種鈣結合蛋白，主要由嗜中性粒細胞和單核細胞分泌。糞便中的鈣衛蛋白是腫瘤性和炎癥性腸胃疾病的標志物。
由于很難區分腸易激綜合征和慢性腸炎疾病，因此要經常對病人進行結腸窺鏡檢查。而鈣衛蛋白檢測能夠很好區分這兩種疾病。糞便中鈣衛蛋白水平與克羅恩病和潰瘍性結腸炎的組織學、內窺鏡檢查具有顯著一致性，也和腸炎疾病的檢測金標準——糞便中銦-111標記的嗜中性粒細胞分泌物具有極高相關性。由于檢測銦-111標記的嗜中性粒細胞的成本較高（住院治療、同位素分析和處理）且病人暴露于放射性環境下，不建議對兒童和孕婦采用該方法。
鈣衛蛋白水平提高預示著相應疾病的復發，是一個比CRP,ESR,HB更好的標志物。將上述標志物與結腸直腸癌的標準便潛血檢測比較后發現，糞便中鈣衛蛋白檢測在診斷上更具優勢：如果糞便中鈣衛蛋白水平很低，極大程度上說明未患有器官性腸道疾病。
檢測糞便中鈣衛蛋白水平有助于：
l 急性炎癥的標志物
l 評估腸胃炎癥程度
l 監測克羅恩病、潰瘍性結腸炎或息肉摘除后病人狀況
進行糞便檢查時區分腸炎疾病（克羅恩病、潰瘍性結腸炎）和腸易激綜合癥。
【樣本要求】
1．采用糞便樣本。
盡管糞便中的鈣衛蛋白保持穩定約6天，仍然建議將糞便樣本于2-8°C下保存且不超過48小時。-20°C下可長期保存。允許將樣本緩慢解凍（于2-8°C下過夜），分析前平衡至室溫。
2．樣本提取
1）建議使用糞便樣本提取試劑盒，取100 mg糞便樣本溶于5ml提取緩沖液中。
緩沖液體積恒量：5ml
稀釋因子：1：50
2）或選擇人工方法，稱重80-120mg糞便樣本，記下確切重量。
a. 向樣本加入5ml緩沖液。
緩沖液體積恒量：5ml
稀釋因子取決于樣本量，使用多少樣本量應考慮后面的計算。請參考下表中正確的稀釋因子：
|
重量（mg） |
稀釋因子 |
重量（mg） |
稀釋因子 |
|
80 |
62.5 |
102 |
49.0 |
|
82 |
60.9 |
104 |
48.1 |
|
84 |
59.5 |
106 |
47.2 |
|
86 |
58.1 |
108 |
46.3 |
|
88 |
56.8 |
110 |
45.5 |
|
90 |
55.6 |
112 |
44.6 |
|
92 |
54.3 |
114 |
43.9 |
|
94 |
53.2 |
116 |
43.1 |
|
96 |
52.1 |
118 |
42.4 |
|
98 |
51.0 |
120 |
41.6 |
|
100 |
50 |
|
|
b. 每個樣本所需緩沖液體積取決于樣本量（見下表）。稀釋因子保持1：50不變。
因此，對于所有樣本來說，相同的稀釋因子可應用于后面的結果評估。
|
重量（mg） |
緩沖液體積（ml） |
重量（mg） |
緩沖液體積（ml） |
|
80 |
4.0 |
102 |
5.1 |
|
82 |
4.1 |
104 |
5.2 |
|
84 |
4.2 |
106 |
5.3 |
|
86 |
4.3 |
108 |
5.4 |
|
88 |
4.4 |
110 |
5.5 |
|
90 |
4.5 |
112 |
5.6 |
|
92 |
4.6 |
114 |
5.7 |
|
94 |
4.7 |
116 |
5.8 |
|
96 |
4.8 |
118 |
5.9 |
|
98 |
4.9 |
120 |
6.0 |
|
100 |
5.0 |
|
|
混合糞便樣本和緩沖液，于渦旋混合器上振蕩至少30秒（取決于糞便硬度）。
移取1ml糞便懸浮液到EP管內，13000g條件下離心5分鐘。
3．樣本稀釋
取樣本提取上清液，用沖洗緩沖液以1：50比例稀釋。例如：20ml上清液（稀釋1）+980ml沖洗液=1：50（稀釋2）。移取100ml稀釋2的上清液用于檢測分析。
(Poullis A et al. (2002) Aliment Pharmacol Thr 16:675-681)
【參考文獻】
1. Poullis A et al. (2002) Aliment Pharmacol Thr 16:675-681
2. Fagerhol et al. (2000) The Lancet 356:1783-1784
3. Tibble et al. (2000) Gut 47:506-513
4. Tibble et al. (2000) Gastro 119:15-22
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