【產品名稱】
通用名稱:人胰島素樣生長因子1檢測試劑盒(酶聯免疫法)
英文名稱:IGF-1 ELISA
【包裝規格】96人份/盒
【預期用途】
本產品用于體外定量測定血清中的人胰島素樣生長因子1(IGF-1)。僅供科研使用,不用于臨床診斷。
背景知識
胰島素樣生長因子1(IGF-1)或生長調節素C(SM-C)是一種基本的70個氨基酸的單鏈多肽(MW:7649 Da),類似于胰島素原(50%序列同源性),也類似于生長調節素家族的另一特征性成員:IGF II(67AA,與IGF-1的70%序列同源性)。IGF-1是最重要的因素,它介導生長激素的促生長作用,生長激素是一種由于脈動釋放而血液水平高度波動的垂體激素。由于與載體蛋白的結合,IGF-1的血液濃度更穩定。主要結合蛋白(MW 53000)的濃度以及IGF-1的產生都受到生長激素的調節。IGF-1由肝臟和其他組織產生,具有內分泌、旁分泌和自分泌活性。它刺激生長并調節各種組織的分化,發揮胰島素樣活性,促進軟骨生長。盡管生長激素是控制IGF-1分泌和濃度的最重要因素,但其他因素也其決定作用:年齡(青春期達到峰值)、性別、營養狀況和其他激素(雌激素,甲狀腺素,催乳素等)。特定的營養刺激主要控制特定器官局部微環境中的IGF-1分泌(旁分泌活性),而血液中IGF-1的濃度是平衡系統生長(內分泌活性)最重要的變量。
【檢驗原理】
人胰島素樣生長因子1檢測試劑盒(酶聯免疫法)是一種在聚苯乙烯滴定板上進行的固相酶擴增敏感性免疫測定。
在本試劑盒中,DIAsource引入了預處理步驟,以提高檢測的臨床性能。已證實結合蛋白干擾了IGF-1的酶聯免疫測定。DIAsource采用的是Daughaday等人的酸-乙醇法(8)。
固定量的辣根過氧化物酶(HRP)標記的IGF-1與校準品、質控品和樣本中未標記的IGF-1競爭特定抗體上有限數量的結合位點。室溫下孵育1小時后,清洗滴定板,終止競爭反應。加入顯色底物(TMB),孵育15分鐘。加入終止液終止反應,采用酶標儀讀取吸光度。通過測量吸光度確定底物周轉量,吸光度與IGF-1濃度成反比。
【主要組成成分】
試劑 |
規格 |
色碼 |
備注 |
微量滴定板:抗IGF-1包被 |
96孔 |
藍色 |
可直接使用 |
結合物:含酪蛋白和百里香酚的磷酸鹽緩沖液中HRP標記的IGF-1 |
1瓶
0.2ml |
黃色 |
用共軛緩沖液100x稀釋 |
共軛緩沖液:含酪蛋白和百里香酚的磷酸鹽緩沖液 |
1瓶
11,5ml |
紅色 |
可直接使用 |
預處理溶液:含乙醇 |
1瓶
20ml |
黑色 |
可直接使用 |
復溶液:含乙醇 |
1瓶
10ml |
藍色 |
可直接使用 |
中和溶液:含牛酪蛋白和疊氮化物的磷酸鹽緩沖液(<0.1%) |
1瓶
30ml |
綠色 |
可直接使用 |
校準品0:溶于含牛酪蛋白的磷酸鹽緩沖液 |
1瓶
凍干品 |
黃色 |
加入1ml復溶液 |
校準品1-5:溶于含牛酪蛋白的磷酸鹽緩沖液(精確值見標簽) |
5瓶
凍干品 |
黃色 |
加入1ml復溶液 |
質控品:溶于含百里香酚的人血漿 |
2瓶
凍干品 |
銀色 |
加入1ml蒸餾水 |
洗液(Tris-HCl)) |
1瓶
10ml |
棕色 |
用蒸餾水100x稀釋(使用電磁攪拌器) |
顯色TMB溶液(四甲基聯苯胺) |
1瓶
25ml |
棕色 |
可直接使用 |
終止液:HCl 1.0 N |
1瓶
12ml |
白色 |
可直接使用 |
注:用校準品0稀釋樣本;
1ng校準品制劑相當于1ng NIBSC 1
st WHO IS 02/254。
【儲存條件及有效期】
本產品在2-8℃下保存,可保存至失效日期。
生產日期及失效日期見試劑盒標簽。
未使用的微孔板,應立即放回附有干燥劑的鋁箔袋中,封好,置于2-8℃下保存。
復溶后的校準品和質控品在2-8℃可保存一周,分裝并置于-20℃下最多可保存3個月。避免連續凍融。
濃縮洗液在室溫下可保存至失效日期。
新鮮制備的工作洗液只能在當天使用。
工作IGF-1-HRP結合物在室溫下可保存4小時,避免光照。
試劑外觀的改變可能表明不穩定或惡化。
【適用儀器】
適用于具有450和650nm波長的酶標儀。
【樣本要求】
血清應置于2-8℃下保存。
如果實驗時間超過24小時,建議分裝并置于-20℃下保存,避免隨后的凍融循環。
注意事項:
(1)實驗開始前,確保樣本恢復至室溫,建議使用前旋渦振蕩樣本。
(2)請勿使用溶血樣本。
僅供科研使用。