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艾狄斯?腎上腺皮質酮檢測試劑盒(酶聯免疫法)

英文名稱:Corticosterone ELA

生產廠商:艾狄斯

【簡介】

僅供科研使用,不能用于診斷程序。

IDS公司的腎上腺皮質酮酶免試劑盒是用競爭法酶聯免疫分析法(EIA)定量檢測大、小鼠血清/血漿中的皮質酮

 

【概要說明】

腎上腺皮質酮(4-孕烯醇酮-11,12-二醇-3,20-二酮)是由腎上腺皮質分泌的,在大、小鼠體內發現的主要糖皮質激素。循環中大部分腎上腺皮質酮由皮質類固醇結合球蛋白運載。大、小鼠的皮質酮水平與人類皮質中的數量狀態相類似,可作為腎上腺功能的指標使用。我們能從促腎上腺皮質激素的釋放(促進分泌)和通過地賽米松或垂體切除術(抑制分泌)中觀察其反應。在循環中,壓力也同樣扮演了一個非常重要的角色。壓力情形將導致腎上腺皮質酮水平迅速增加,這些壓力情形包括溫度的改變、實驗的刺激或非常規事件的出現。

 

【方法描述】

 

IDS公司的腎上腺皮質酮酶免試劑盒采用競爭法酶聯免疫分析法,該方法利用多克隆抗體包被至聚苯乙烯微量板內表層。定標、質控和稀釋樣本與標上腎上腺皮質酮的酶(辣根過氧化物酶)在包被抗體微量孔中2-8°C下一同孵育過夜。清洗微量孔并用發色底物(TMB)使其生成顏色。停止反應混合物并在微量板讀數儀上讀取其吸光度,顏色的強度與樣本中腎上腺皮質酮的的濃度成反比。

 

【樣本收集和保存】

 

該檢測應使用血清或血漿樣本(EDTA、肝素、檸檬酸鹽)。樣本在收集后應立即進行離心分離。如需長期保存,應儲存在-20°C。避免反復凍溶樣本。

 

操作簡介

 

樣本稀釋

30 μL的樣本

270 μL的樣本稀釋液SAMPDIL旋渦混勻

 

檢測

加入100 μL標準液CAL 質控液CTRL或稀釋后的樣本至抗體包被的微量板中MICROPLAT .

加入100 μL的酶結合物溶液

孵育:16-24小時@ 2-8°C

洗板

加入200 μL TMB底物SUBS

孵育:30分鐘 @ 18-25°C.

 加入100 μL終止液HCL

                                                                     讀板 @ 405nm.

 

 

參考文獻

1.     Corker C.S. Karolinska Symposia on Research Methods in Reproductive Endocrinology : Steroid Assay by Protein Binding. E. Diczfalusy, ed., p 153 (1970).

2.     Keith L. D., Winslow J. R. and Reynolds R. W. Steroids, 31: 523 (1978).

3.     Shimizu K., Amagaya S. and Ogihara Y. : Analysis of Corticosterone in the serum of mice and rats, using high performance liquid chromatography. J. Chromatography, 272: 170

4.      Vining R.F., James D. E., Bennett S. P. and Kraegen E. W. Steroids, 38: 297 (1981)

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