阿狄科™1,25雙羥基維生素D3和D2免疫提取試劑盒
【產品名稱】
通用名稱:1,25雙羥基維生素D3和D2免疫提取試劑盒
英文名稱:1,25-(OH)2-vitamin D3/D2ImmuTube®LC-MS/MSextraction kit
【包裝規格】50人份/盒
【預期用途】
用于通過免疫親和富集從血清和血漿中提取1,25雙羥基維生素D3和D2,可用于液相色譜-串聯質譜(LC-MS/MS)應用的樣本制備。此產品供專業實驗室人員操作使用。
僅供科研使用。僅用于體外診斷。
【背景知識】
維生素D或在皮膚中產生(在紫外線照射下),或從營養物質中合成。維生素D儲存類型即25-羥基維生素D,是在肝臟中形成的。激素1,25-雙羥基維生素D(D激素)經過腎臟的第二個羥基化步驟中生成。負責的酶,腎1α-羥化酶受到激素(尤其是甲狀旁腺激素)的嚴格控制,及其活性受血清鈣和磷濃度的影響。
1,25-雙羥基維生素D的血清濃度通常會重新調整到新陳代謝的需求。因此,與1,25-雙羥基維生素D正常范圍的偏差必須始終結合鈣代謝的剩余參數進行解釋。1,25-雙羥基維生素D的血清濃度只有在維生素D缺乏的極少數情況下才會降低。診斷維生素D是否缺乏,應測定前體代謝物,25-羥基維生素D。
可在代謝紊亂中找到1,25-雙羥基維生素D缺乏的原因,或由酶1α-羥化酶的遺傳缺陷(罕見)或腎功能障礙(更常見)引起。即使是輕微的腎功能受損也會導致1,25-雙羥基維生素D濃度下降。
由于1,25-雙羥基維生素D在鈣代謝以及補充甲狀旁腺分泌甲狀旁腺激素方面具有重要功能,因此腎功能障礙的增加會導致腎性骨病的發展,其特征是骨軟化和纖維性骨炎。
腎性骨病的治療包括給藥1,25-雙羥基維生素D(骨化三醇)或激素原1α-羥基維生素D。在腎小管功能障礙中發現1,25-雙羥基維生素D減少或相對較低水平(如尿崩癥,范可尼綜合征)。肉芽腫病(如結節病)會導致1,25-雙羥基維生素D的非生理性過量產生,腎外會合成1,25-雙羥基維生素D。這會導致高鈣血癥。在特發性高鈣尿中也發現了相對較高水平的1,25-雙羥基維生素D。在缺鈣營養期間,非功能性維生素D受體(罕見)以及甲狀旁腺激素(原發性甲狀腺功能亢進)過量產生的情況下,1,25-雙羥基維生素D濃度增加。
補充維生素D有兩種不同的形式:鈣化醇(維生素D2)和膽鈣化醇(維生素D3)。根據對嬰兒佝僂病預防的研究,藥典正式將這兩種形式視為等效和可互換的。測定1,25-雙羥基維生素D3/D2作為測量1,25-雙羥基維生素D狀態的指標,提供了對服用維生素D生物反應的客觀、定量測量。
適應癥:
慢性腎衰竭
腎移植后血液透析
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腎性骨病
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各種維生素D代謝紊亂引起的骨軟化癥
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腎小管功能障礙(尿崩癥、范可尼綜合征)
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監測活性維生素D代謝物的治療
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意識形態性高鈣尿癥
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高鈣血癥
【主要組成成分】
貨號 |
標簽 |
組分 |
數量 |
KM0003 |
WASHSOL |
洗液 |
80 ml |
KM1100 |
COLUMNS |
ImmuTube®1,25-(OH)2-維生素D3/D2提取柱 |
50個 |
ELUSOL |
洗脫液 |
20 ml |
使用本品時可配套使用本司以下額外產品:
• 1,25-雙羥基維生素D3/D2 ImmuTube®檢測試劑盒(液相色譜-串聯質譜法) (貨號: KM1000)
• 1,25-雙羥基維生素D3/D2調諧液(貨號: KM1000TU)
•內標調諧液(貨號: KM1000TS)
• UPLC 色譜柱 (貨號: KM1000SP)
•串聯過濾器 (貨號: KM1000IF)
•串聯過濾器支架 (貨號: KM1000IH)
如有需要,請與我們聯系額外產品的報價。
【儲存條件及有效期】
避光,保持干燥并在2-8℃下儲存可穩定至標簽所示有效期。
【檢驗方法】
1. 自備材料:
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玻璃管(內徑10mm)
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標準實驗室一次性塑料試管(內徑10mm)
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校準過的10-1000μl高精度移液器和配套的一次性槍頭
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可提供10000g離心力離心1.5mL Eppendorf離心管的離心機,和提供550g離心力離心玻璃管的離心機
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多通道移液器/連續加樣器
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漩渦混合器
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真空離心機或氮吹儀
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旋轉混勻儀
2.試劑準備:
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實驗適用的樣本為血清或血漿。
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使用前必須對樣本進行離心(以10000g至少離心5分鐘)。
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每次實驗應檢測對照樣本。
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實驗開始前,將所有樣本和試劑平衡至室溫(18-26℃)。
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使用前將樣本和試劑應充分混合。
3. 操作步驟:
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小心漩渦并離心ImmuTubes®(以500-1000rpm轉速旋轉30秒),確保瓶蓋中沒有任何懸浮液。
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標記ImmuTubes®的瓶蓋,打開ImmuTubes®,快速加入樣本500μl,關閉ImmuTubes®并輕輕混合。
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在旋轉混勻儀 (15-20rpm)上室溫下孵育1小時。
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將密封的Immutube®插入塑料試管中,以550g離心1分鐘。
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擰斷Immutube®免疫提取管底部,然后插入塑料試管并以550g離心2分鐘至干燥;丟棄離心出來的液體。
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加入洗液(WASHSOL)500μl并以550g離心2分鐘至干燥;丟棄離心出來的液體。共清洗三次。
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標記新的玻璃管,將ImmuTubes®放入標記后的玻璃管中。
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加入洗脫液(ELUSOL)250μl,以550g離心2分鐘,將含有1,25-(OH)2維生素D3/D2的洗脫液收集在玻璃管中)。
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在37℃的氮氣流下或在真空離心機中蒸發洗脫液。
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在165μl溶劑中漩渦剩余物1分鐘,該溶劑調整至流動相。
技術要點:
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不同批號的組分不可混用。
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超過試劑盒標簽上顯示的有效期的試劑不能使用。
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應始終按照所附說明書進行實驗。
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不同試劑的瓶塞和瓶蓋不得調換。
【注意事項】
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須注明各組分和材料安全數據表(可向Immundiagnostik AG索取)規格上的GHS符號。使用試劑時,必須遵守法律規定的防護措施。
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洗脫液(ELUSOL)必須作為非鹵化溶劑處理。
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本試劑盒依據98/79/EC的IVD指南生產和銷售。
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ImmuTube®是本公司(Immundiagnostik AG)的商標。
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試劑盒中的所有試劑僅供體外診斷使用。
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應遵循醫學實驗室的指導方針。
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孵育時間、孵育溫度以及加樣量由生產商制定,任何與生產商規定不一致的變化,可能會影響檢測結果。因此,本公司不承擔任何由錯誤操作引起的后果;
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如果試劑盒的一個或多個組分損壞、丟失(見提供的材料)或在準備使用的溶液中發現可見沉淀物,請與本公司(Immundiagnostik AG)聯系。
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若有索賠和投訴,必須在收到貨后14天內,將產品和書面投訴寄到本公司(Immundiagnostik AG)。
【參考文獻】
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Withold, W. et al., 1995. Evaluation of a radioimmunoassay for determination ofcalcitriol in human sera employing a 125I-labelled tracer. European journal of clinicalchemistry and clinical biochemistry : journal of the Forum of European ClinicalChemistry Societies, 33(12), pp.959–63.
本品僅供科研使用。